Polymerase Chain Reaction (PCR)

Pengertian

Polymerase chain reaction (PCR) adalah sebuah prosedur yang ditemukan oleh  Kary Mullis pada tahun 1986. Prosedur ini banyak digunakan untuk penelitian mengenai DNA di bidang biologi maupun kedokteran. PCR melengkapi prosedur amplifikasi DNA lainnya yang telah ditemukan.

Jika anda masih bingung dengan proses kerja PCR, maka saya akan mengumpamakannya dengan prosedur memfotokopi sebuah buku. Umpamakan kita memiliki sebuah buku dan kita ingin memfotokopi beberapa halamannya.

Buku kita ibaratkan kromosom yang memiliki jutaan atau milyaran halaman informasi. Tentunya saat ingin memfotokopi buku, kita akan menandai halaman yang ingin kita fotokopi dan membuka buku pada halaman tersebut. DNA manusia memiliki struktur dobel heliks yang berikatan satu sama lain dengan ikatan hidrogen. Sama seperti buku yang dibuka, ikatan DNA juga perlu “dibuka” dengan cara dipanaskan. Pemanasan pada suhu tertentu akan membuka ikatan hidrogen tersebut dan mempermudah reaksi.

Untuk menggandakan sekuens atau bagian tertentu dari DNA, kita perlu mengidentifikasi halaman. Identifikasi pada sekuens DNA dilakukan dengan primer yang terdiri dari primer forward (F) dan reverse (R).

Selanjutnya, halaman atau sekuens DNA digandakan dengan enzim yang bernama Taq polymerase menjadi jumlah yang banyak. Proses pemanasan-primer-reaksi dengan enzim polimerase berlangsung selama beberapa siklus dan suhu tertentu. Untuk anda yang melakukan penelitian dengan menggunakan prosedur PCR dapat berkonsultasi dulu dengan supervisor maupun mencari jurnal dengan penelitian serupa. Cara lain adalah dengan menggunakan GenBank.

Penjelasan PCR dengan video dapat dilihat pada tautan berikut :

Penggunaan PCR di dunia forensik di antaranya untuk penelitian dengan gen manusia dan pemeriksaan garis keturunan (orangtua, ayah saja, ibu saja, maupun keturunan lainnya). Bahasan mengenai penggunaan PCR akan dibahas penulis di artikel lain.

Referensi

Mullis, K.,etal.(1986) Specific enzymatic amplification of DNA in vitro – the polymerase
chain-reaction. Cold Spring Harbor Symposia on Quantitative Biology 51, 263–273.